第203章 孙教授:打不过能加入吗? (第3/3页)
行过柱,为了洗掉多糖杂质,我们专门配制了一种含高浓度盐酸胍和异丙醇的洗脱液,反复洗脱三次。” “虽然这个流程耗时要四个多小时,成本也高,但纯度那是没得说,a260/280的比值,我们稳定做到了1.75以上!这在当前的液体活检领域,绝对是领先水平!” 说完,孙长明往椅背上一靠,端起桌上的水杯喝了一口,等待着惊叹声。 1.75的纯度,在08年,确实值得骄傲。 然而,实验室里众人的表情都怪怪的。 大家面面相觑,好像不知道该说什么好。 孙长明皱了皱眉:“怎么?没听懂?也是,这套酶解过柱的体系确实复杂了点,你们刚接触湿实验,慢慢来……” “不是,孙教授。”陈浩默默地举起了手,“我有个问题。” “你说。”孙长明点点头。 陈浩语气真诚地发问:“既然是要解决蛋白污染和降解的问题,为什么一定要用蛋白酶k去水浴消化一个小时,还要花那么高成本去买离心柱反复洗脱呢?” 孙长明愣了一下:“不用这些,你怎么去蛋白?怎么提纯?” 陈浩理所当然地回答:“双重氯仿抽提,加糖原共沉淀啊,我们老大提出来的这个方法,牺牲点第一次的上清液体积,再加一次氯仿离心,蛋白就全沉下去了,然后补5微升糖原把rna析出来,整个流程下来四十分钟就搞定了,效果很好呀,为什么要搞得像你那么复杂?” 孙长明:“?” 反应了半天后,孙长明抗拒道:“不对,氯仿确实能去蛋白,但你抽提两次,水相里的rna早就流失得七七八八了,就算加了糖原,浓度也绝对达不到下游要求,纯度就更别提了,能过1.5都算你们运气好。” “可是……”蔡卓群在旁边忍不住插嘴。 “没什么可是的,科研需要的是严谨,你们用这种糙办法,跑出来的数据全都是假阳性或者直接假阴性。” 就在这时,很巧嗷。 离心机跑的新一批内容出来了。 陈浩道:“孙教授,数据是不是真的,测一下就知道了。” 蔡卓群立刻上前,打开离心机盖,加入无酶水,溶解。 nanodrop分光光度计前。 1微升的样本滴入基座。 测量! 屏幕刷新,一排数据跳了出来。 浓度:14.5 ng/ul。 a260/280:1.95。 a260/230:2.03。 孙长明:“啊?” 1.8到2.0是rna纯度的完美区间。 他引以为傲、耗时四小时、加了各种昂贵试剂才跑出的1.75。 可这个呢? 1.95是什么鬼啊! “换一管,再测。”孙长明不信邪。 蔡卓群依言换了第二个样本。 浓度:13.8 ng/ul。a260/280:1.92。 第三管。 浓度:15.1 ng/ul。a260/280:1.96。 极其稳定的高纯度,完美的数据重现性,没有任何悬念的绝对碾压。 孙长明,不嘻嘻。 陈浩在旁边补了一刀:“孙教授,你看,四十分钟提出来的,效果是不是比你那个好多了?” 杨煦绷不住了,哈哈大笑:“老孙啊,你那个蛋白酶k水浴一小时的方法,确实挺有创意的,就是费时费力还费钱,没关系,坚持你的想法,相信你一定行!” 孙长明沉默半天,最后也客气的笑道: “嗯……数据还算凑合吧,不过,不同组织的样本特性不一样,你们这套方法在血清上管用,在我们消化道黏液样本上,未必适用,科研嘛,就是要在不同的方向上多做尝试,加油吧。” “哎呀,想起来了,我培养箱里的那些细胞还没换液呢,今天就不跟你们多聊了,走了啊。” 他说完,便朝门口走去。 轻轻的他走了,正如他轻轻的来,挥一挥衣袖,不带走一丝云彩~ …… 出门。 孙长明伸手捂住胸口,喘不上气。 呃啊,难受啊! “双重氯仿……糖原……” 孙长明一边扶着墙往研究所走,一边在嘴里反复念叨着这几个词。 “妈的,这小子到底怎么想出来的?这哪来的方法?我什么时候能跟他一起做实验?” 孙教授试图依赖江河。 要不把项目组解散算了,打不过就加入吧? 王教授不都加入学生团队了吗,我就不行? 嗯……现在还来得及吗? 有没有什么优雅的投靠姿势?在线等,挺急的。
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