第134章 黎明前的测序 (第2/4页)

现在是凌晨两点。

    二十分钟后，肿瘤研究所中心实验室大门外。

    六个医学生顶着睡眼惺忪的脸，气喘吁吁地跑了过来。

    陈浩连扣子都扣错了，程溪瑶的头发随便用皮筋扎在脑后。

    江河站在实验室门口等他们。

    陈浩问：“老江，大半夜的，出什么事了？嫂子呢？”

    江河简单回答：“你嫂子在酒店，附一院有紧急情况，我们要连夜做个研究。”

    “啊？”程溪瑶一愣，“嫂子来了？”

    “这不是重点吧！”易向晚有些紧张道，“原来是紧急情况吗？可是老大，咱都是新手啊？你怎么不去找附一院检验科的人？”

    答案很简单。

    检验科的老师们有自己的操作习惯。

    如果江河去指挥他们，他们会质疑为什么不加这个试剂，为什么要改那个参数。

    沟通成本极高。

    但这六个人不同。

    过去的一段时间里，江河给他们进行了地狱般的rna提取理论授课。

    他们对江河的话言听计从，执行江河的作业程序不会有任何折扣。

    所以，江河道：“听好，医院收治了一例极高危的不明原因重症肺炎患者，现在我怀疑是一种新型的重组流感病毒，我们需要在今晚，提取出病毒的rna，逆转录成a，跑出pcr扩增片段，然后上机测序，拿到它的基因序列证明。”

    六个人：“？？？”

    唐培：“老，老大……这什么未知病毒的，我们做……安全吗？”

    “送来的样本是经过硫氰酸胍彻底裂解灭活的，它现在只是一堆核酸物质，没有传染性，这和我们前几天培训的提取外周血游离mirna的底层逻辑完全一致，甚至因为我们要提取的是病毒的基因组rna，丰度更高，操作上反而更容易。”

    “重点是，防止环境里的rna酶降解样本。”

    江河严肃道：“你们是我亲自教出来的，我对你们的实验规范有绝对的信心，今晚的操作，每一步都必须严格按照我教的规范来，不许有任何多余的动作，听明白了吗？”

    “明白！”陆晓林年纪最长，第一个出声回应。

    “明白了老江，你说咋干就咋干。”陈浩拍了拍脸，让自己彻底清醒。

    “去更衣室，穿两层隔离衣，戴双层乳胶手套，n95口罩，护目镜，进核心区。”

    凌晨3:15。

    柯正提着一个密封的生物安全转运箱来到了实验室门口。

    他把箱子交给江河：“江河，这是马克的深部支气管肺泡灌洗液，已经加了裂解液灭活了。”

    “好。”

    江河接过箱子，转身刷卡进入实验室核心区，立刻说道：

    “第一组，陈浩、向晚，你们负责配制试剂，所有的depc水、无水乙醇、异丙醇，全部重新开封新的，确保绝对无rna酶污染，操作台用rnasezap喷洒擦拭两遍。”

    “第二组，程溪瑶、唐培，你们负责给所有的移液枪换上带滤芯的枪头，准备好离心管和冰盒。”

    “师兄，亦舟，你们俩配合我，准备过柱子提取。”

    江河站在超净工作台前，将转运箱打开，取出装有灭活样本的冻存管。

    “开始。”

    实验室内。

    严肃，高效。

    这群年纪轻轻的学生，此刻展现出了惊人的纪律性。

    这就是培训的成果！

    江河拿起一把p1000的移液枪，套上带滤芯的枪头。

    “加入trizol试剂，1毫升。”

    将样本移入新的离心管中，注入trizol。

    透明的液体瞬间混合。

    “室温静置5分钟，让核蛋白复合体彻底解离。”

    江河看了一眼墙上的挂钟。

    五分钟一到。

    “加氯仿，0.2毫升。”

    “盖紧管盖，剧烈振荡15秒。”

    “静置3分钟。”

    顾亦舟在一旁已经打开了高速冷冻离心机的盖子，温度已经预冷到了4c。

    “放入离心机，配平，12000转，15分钟。”

    这15分钟极其漫长。

    “滴——”

    离心机停止。

    江河小心翼翼取出离心管。

    在冷光的照射下，管内的液体清晰地分成了三层：

    底层是红色的酚氯仿相，中间是一层薄薄的白色蛋白交界面，最上层是无色的水相。

    所有的病毒rna，都溶解在这最上层的无色水相中。

    江河深吸了一口气，换了一把p200的移液枪。

    这一步是整个提取过程中最关键的一步。

    如果吸到了中间的蛋白层或者底层的有机相，整个样本就废了。

 

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