第164章 实验正式开始 (第1/3页)

    第164章 实验正式开始

    江河今日，提前下班。

    医院这边的子弹，且让它先飞一会儿。

    回学校推进科研项目去。

    重症急性胰腺炎的论文已经发出，接下来的重头戏，是mirna早筛。

    这玩意做出来，是真正能撼动全世界的核武器，更是他前世今生执念的所在：

    ——攻克胰腺癌，从极早期的精准筛查开始。

    返回南医大的公交车，江河在项目组的qq群里发了一条消息。

    “所有人，一小时后，实验室开会。”

    实验室。

    江河进去的时候，众人都乖巧坐着。

    “老大。”易向晚道，“你不是上班么？怎么这会儿就回来了？没有迎新聚餐什么的？”

    “聚餐没有，倒是给我排了十五张重症床位。”

    “啊，十五张？附一院现在把新人当牲口使啊？”

    “没事，不用管医院那边，今天喊你们过来，是因为我们前期收集的几百份冻存血清样本已经全部到位了，mirna早筛项目，从今天开始，正式进入湿实验阶段。”

    此话一出，几个人的神色瞬间变得严肃。

    跟江河混了这么久，他们很清楚这个项目的分量。

    江河从包里拿出一沓打印好的a4纸，分发给众人。

    “这是我这两天做出来的实验方案，大家先看一看。”

    众人接过方案，低头翻阅。

    江河：“这个项目的前景有多大，我以前跟你们说过，但我今天必须给你们打个预防针，这个过程，会极其枯燥，且充满挫折。”

    “简单来说，我们要在血液里，找到与肿瘤相关的mirna，目前，针对血清mirna的商业化提取试剂盒还不够成熟，我们只能用最基础的方法来做。”

    江河站起身，走到白板前，拿起马克笔画了一个简单的流程图。

    “第一步，rna提取，这是最耗时的一步，也是你们未来几个月每天都要重复的工作。”

    “我们手头有近六百份血清样本，我要求你们使用trizol ls试剂法来进行提取，因为血清中本身存在大量的rnase（核糖核酸酶），如果不迅速裂解，我们的目标rna就会降解得一干二净。”

    “记住几个核心要点。”

    “第一，绝对的无酶环境，我们的枪头、ep管必须是去rna酶处理过的，台面每天实验前用rnasezap喷洒后，再用depc水擦拭。”

    “第二，加氯仿后的相分离，离心完，吸取上层水相的时候，手千万不要抖，哪怕少吸一点水相，也绝不能吸到中间的白色蛋白层，一旦污染，后面的数据全废。”

    唐培认真地在方案上做着笔记：“老大，提取完之后呢？”

    “提取完之后，是逆转录（rt）和实时荧光定量pcr（qpcr）。”

    江河写下了一个数学公式。

    “这是相对定量的计算公式，但因为mirna太短了，只有大约22个核苷酸，传统的随机引物根本无法对其进行逆转录，所以，我们需要在逆转录之前，进行poly(a)加尾，或者使用特异性的茎环（stem-loop）引物。”

    “现阶段，我们用最基础的加尾法，这些长周期、重复性的基础提取和建库工作，我今天全部分配下去，两人一组，轮班倒，一个月内，我要看到这六百份样本的a文库全部建立完毕，听明白了吗？”

    顾亦舟严肃点头：“没问题老大，交给我们。”

    江河看着手里的实验方案，突然想到副院长张随。

    张随是美国约翰·霍普金斯大学医学院的博士后。

    在08年，全球范围内在mirna循环标志物领域走得最前沿的，除了哈佛的几家附属医院，就是约翰·霍普金斯的肿瘤学团队。

    他们是江河这个项目在

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